除了平板实验之外,秦霜还
给陆成的另外一个实验就是Transwell侵袭实验,侵袭实验其实和平板划痕实验的
质是差不多的。地址发布邮箱 LīxSBǎ@GMAIL.cOM
但是两者的目的却是稍有差别。
很容易理解,平板划线法是在平板上,也就是一个平面上,细胞的迁移速率,与正常组细胞进行对比,从而得出处理组的迁移速率是快还是慢。
但是Transwell却是不一样的,因为Transwell小盒子的上层铺了一层胶质,这一层胶质可以阻挡细胞的下移,只有细胞分泌出可以溶解这一层胶质的金属蛋白酶,才能够
开胶质,然后达到营养更加丰富的下层。
这是针对肿瘤细胞侵袭能力,也是它能够分泌金属蛋白酶,穿
一定的障碍物的能力,发生侵袭的实验。
所以其实两个实验的模式是完全不一样的、
因为秦霜已经养好了细胞,所以陆成再进行后续的
作的时候,就直接省去了再要重
开始养细胞的步骤,
而两个实验中,平板划线法的实验最多只需要48h即可,但是这个实验唯一有的麻烦就是,必须在6、12、18、24和4时的时候,记录下划痕缩小的面积,以此来算迁移比率。
是相对比较消耗时间的一种。而Transwell实验,也是需要计算下层更加丰富的营养基质中细胞的数量,来计算两组细胞侵袭能力的差异的。
如此一来,陆成除了明天晚上必须要守在实验室之外,后天的相同时间,也要来到实验室再进行一次统计,这样与他后天的手术,略有冲突。
虽然最后是有冲突的,但是陆成还是选择了在今天就完成了相应的
作。因为在细胞铺满平板之前,需要经过二十四小时的沉淀,才能够均匀的铺满,然后好进行划线的
作。
大不了,后天让一个师姐或是师哥帮他看一下就行了。
看到陆成利索地完成了相应的
作,秦霜也是放下了心来。
这看似是一种
罐子
摔的行为,但是其实也是对陆成一些基础实验的一种考验,如果陆成连平板划线的前期准备工作都做不好,那么后续的实验
作,他可能就真的需要一点一点来学的。
而且,秦霜还注意了陆成在做Transwell实验前期准备的一个细节,那就是让肿瘤细胞处于饥饿状态。
处于饥饿状态,也就是营养不足一段时间的肿瘤细胞,是更加迫切地需要大量的营养的,这样可以更加增加它的侵袭力,让实验的
作更加具有说服力。
……
而与此同时,陆成在完成了这两步的前期准备之后,也是有实验室的其他
,慢慢地给陆成布置了任务了。
就比如说费恩教授的两个博士生,凯瑟琳和查尔斯,都是把简单的细胞培养的
作,
给了陆成。
虽然讲,细胞的培养,也就是换
、分装这些最为基本的
作,但是,这是一个好的开始,陆成明白自己才来实验室第二天。
就有师兄和师姐愿意给他
作让他练习,这就是一个好的开始了,也代表了别
的认可。
有了基础的实验放手了,那么后续的实验,还会晚吗?
当天的下午,就有一个师兄主动地带着陆成完成了一次WB的相应
作,并且,还有一位做了过表达基因转录处理细胞组的师姐,还带着陆成做了RT-PCR的
作。发布页LtXsfB点¢○㎡
陆成知道这个RT-PCR的
作目的。
这是进行很多实验中都是比较重要的一环。
比如说,我们需要研究一个基因,那么一般都至少会分成以下几组。
第一组,某个基因的普通对照组,也叫
对照组,也就是不进行任何的处理。
第二组,则是某个基因的过表达组,使得这个基因在某一个细胞的基因序列中高表达,高表达之后,看它后续实验中,是否会出现与
对照组不一样的地方,来进行判别基因的功能。
同样的,为了避免它增多的阳
效果带来的误差,同时会对这个基因进行沉默或是敲除,也就是在沉默了这段基因,不让它表达功能的时候,与
组对比,是否会出现一系列的差异。
如此更具有说服力。
这是常规的第三分组。
第四分组,如果需要实验更加的完善的话,那么肯定还需要用一个专门的基因沉默的药物,与正常组作比较,证实它是可以通过药物来沉默的,以验证这个基因具有研究价值,甚至可能用于临床。
以上的四个分组相互比较之后,就是一组比较完善的实验组的分配了,做到这么系统的对比,说服力自然是大大加强。
但是,这一切对照组有效的前提就是,你得证明你的确是过表达了或是沉默了基因。
这个时候,就需要RT-PCR来验证基因序列的表达量了,也是用来筛选可能出现的,转染不成功,或是转染效率很小的
况。
很多的实验,很可能有
因为麻烦、费钱就会省掉这一步,但是这并不符合一个比较严谨的实验流程的。
因此,陆成也是知道了RT-PCR的相关
作流程,至少看了一遍,再结合理论的知识,下一次自己要做的时候,心里至少知道该怎么做。
而且以陆成现在几乎是过目不忘的能力,这些
作他只要看了一遍,几乎就能够完全记住,所以根本就不害怕到时候重复不出来。
……
如此一来,陆成在实验室的第一小步,就这么走了出去。
实验室里的
也是知道了陆成这个新
的存在,而且,在秦霜、凯瑟琳等
的介绍下,她们还同时给一些研究生的学弟和学妹
待,如果有什么简单的,不愿意做的,比较麻烦的
作,可以让陆成给练练手。
嘿,还真别说,因为秦霜和凯瑟琳的开
,陆成第二天就被委托了几个实验
作。
比如是让陆成测几瓶肿瘤细胞里面
酸和葡萄糖的浓度,这些比较简单的
作。
陆成当然不会嫌弃他简单啊,因为虽然
作简单,但是量并不小。
因为知道了陆成反正要做测定
酸和葡萄糖,于是就像实验室里的传统一样,一些需要做这两样测定的所有其他
,都是不约而同的把自己的细胞
给了陆成。
堆积下来,竟然就有四份样本需要做了。
练手的机会可是大大的有。
陆成看了一下,
作明天中午来做一下就差不多了。
……
时间缓缓而过,一下子就来到了周三。
周三的早上,陆成虽然很早就来到了实验室,但是其实他的心
并不是很好的。
因为就像之前就预料过的,周二进行手术的雷克斯,术中所见,并不是很好,几乎已经广泛的转移了,虽然目前没有发现远处转移的证据。
但是,那几乎是可以预料的事
,而且也没有任何的化疗方案对其进行补救。
也就是说,最后,等待雷克斯的,就只有三到五年的寿命,这个年轻的小伙子就会离开世界。
当时雷克斯的父母和雷克斯都没办法接受这个事实,但是,事实就是如此,这是任何
都没有办法逆转的事
,这也是当前的技术限制。
虽然他们大哭一场,但是除了自己的发泄和在陆成等